E.D. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomiset Fitoftora infestanlar (Mont) de Bary, patates ve domateslerde tehlikeli bir hastalık olan geç yanıklığa neden olur. Birincil aşının ana kaynaklarından biri P. infestans kalın duvarlı üreme dinlenme yapılarıdır - oosporlar.
Genetik olarak farklı ebeveyn suşlarının geçmesi sonucu oluşan hibrit oosporlar, popülasyondaki genotipik çeşitliliğin artmasına katkıda bulunur, bunun sonucunda suşların yeni çeşitlere ve uygulanan fungisitlere adaptasyon süreci hızlandırılır.
Oospor oluşumu P. infestans Dünyanın birçok ülkesinde tarla koşullarında gözlemlenmiştir: Rusya (Smirnov ve diğerleri, 1999), Norveç (Hermansen ve diğerleri, 2002), İsveç (Strömberg ve diğerleri, 2001), Hollanda (Kessel ve diğerleri, 2002) ) ve diğer bölgeler. Oosporlar toprakta canlı bir durumda 2 yıldan fazla hayatta kalabilir (Bødker ve diğerleri, 2006) ve kışlamanın ardından bitkilerde enfeksiyona neden olabilir (Ulanova ve diğerleri, 2010; Lehtinen ve diğerleri, 2002).
Daha önce, bir patates fidesinin farklı katmanlarındaki bitkilerin yapraklarının, geç yanıklığa karşı direnç açısından farklılıklara sahip olduğu gösterilmişti; alt yapraklardan üst yapraklara doğru artar. Bu eğilim yaprak yaşına, bitki yaşına veya patates çeşidine bağlı değildir (Vesper ve ark., 2003). Aynı zamanda literatürde patates fidelerinin farklı katmanlarındaki yapraklarda oospor oluşumunun yoğunluğundaki farklılıklara ilişkin veri bulamadık. Ancak bu tür farklılıklar mevcutsa, oospor oluşumunun analizi için yaprak örnekleri seçilirken ve diğer yazarlar tarafından elde edilen sonuçlar yorumlanırken bunlar dikkate alınmalıdır. Bu çalışmanın amacı, aynı nemli odalara yerleştirilen bir patates bitkisinin farklı katmanlarındaki ayrık yapraklarda oospor oluşumunu incelemektir.
Malzemeler ve yöntemler
Bu çalışmada 5 izolat kullanıldı. P. infestans Moskova, Ryazan ve Leningrad bölgelerinden getirilen etkilenen örneklerden izole edilen farklı çiftleşme türleri. Bunlardan, yulaf agar ortamında test edildiğinde bol miktarda oospor üreten, farklı çiftleşme tiplerinden 3 çift suş seçildi.
Test için, bir serada (turba substratında) yetiştirilen aşağıdaki çeşitlerin virüssüz patates bitkilerini kullandık: erken Sandrin, Zorachka, Uladar, Osiris, erken erken Ilyinsky, sezon ortasında Yanka.
Analiz için patates bitkisinin farklı seviyelerinden basit yapraklar seçildi. Çalılığın alt seviyesinden üç yaprak (4 alt karmaşık yaprak), üstten üç yaprak (üstte 3-4 karmaşık yaprak) ve çalının ortasından üç yaprak seçildi. Basit yapraklar tartıldı, koordinat kağıdı üzerinde fotoğrafları çekildi (hacim ve alanı hesaplamak için) ve daha sonra 25 ml Petri kutularına dökülen steril suyun yüzeyine alt tarafı yukarı bakacak şekilde yerleştirildi. Daha sonra her bir yaprağa, çiftleşme tipi A1 ve A2 izolatlarından elde edilen karışık zoosporangia süspansiyonunun bir damlası ile enfekte edildi. Her seviyeden örneklenen üç yaprak için, üç farklı izolat çiftinden alınan inokulum kullanıldı. Bir yaprağa, bir çift izolattan elde edilen bir aşı karışımı ile enfekte edildi.
Bir zoosporangia süspansiyonu hazırlamak için, farklı çiftleşme türlerindeki izolatlar 7 gün boyunca agar yulaf ezmesi ortamında büyütüldü, ardından zoosporangia, steril damıtılmış su ile yıkandı. Aşı konsantrasyonu, 5x büyütmede mikroskop görüş alanı başına 7-80 zoospordu. Her bir yaprağa, çiftleşme tipi A1 ve A2 izolatlarından elde edilen karışık zoosporangia süspansiyonunun bir damlası ile enfekte edildi.
Tüm deneylerde varyant başına 3 patates yaprağı kullanıldı. 20°C'de 18 gün inkübasyondan sonra her yaprak 2 ml distile su içeren havanda homojenleştirildi. Ortaya çıkan süspansiyondan, mikroskopi için preparatların hazırlandığı 3 numune alındı.
Her varyantta 180 görüş alanı incelendi ve ardından 1 mm başına düşen oospor sayısı yeniden hesaplandı.2 yaprak yüzeyi. Her seçenek için anket sonuçlarının ortalaması alındı.
0,05 anlamlılık düzeyi için güven aralığını (μ) hesaplamak amacıyla aşağıdaki formül kullanıldı:
burada s standart sapmadır, n ölçüm sayısıdır, t ise 0,05 anlamlılık düzeyi için t-testi sabitidir. Tüm hesaplamalar Excel'de (Microsoft Office paketi) yapıldı.
sonuçlar ve tartışma
Bir patates fidanının farklı katmanlarından toplanan ve aynı koşullardaki nemli odalara yerleştirilen yaprakların aşılanması, oospor oluşumunun yoğunluğundaki farklılıkları ortaya çıkardı. İncelenen tüm çeşitlerde, çalının alt ve orta katmanlarından toplanan yaprakların aşılanması sırasında maksimum sayıda oospor oluşmuştur. Alt ve orta yapraklarda oospor oluşumunda önemli bir fark bulunmadı.
Üst kademenin yapraklarında minimum sayıda oospor oluşmuştur (Şekil 1).
Alt ve orta katmanların yapraklarında Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar ve Osiris çeşitlerinde maksimum sayıda oospor oluşmuştur. Yanka çeşidinin yapraklarında biraz daha az yoğun olarak oluşmuşlardır. Üst kademenin yapraklarındaki maksimum oospor sayısı Uladar çeşidinin yapraklarında gözlendi, bunu azalan sırayla Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky, Sandrin takip etti, ancak tüm farklılıklar istatistiksel olarak anlamlı değildi.
Pirinç. 1. Bir patates çalısının farklı katmanlarındaki yapraklarda oosporların oluşumu. Alttakiler çalının üç alt seviyesinin yaprakları, üsttekiler bitkinin tepesinden çıkan 3-4 karmaşık yaprak, ortadakiler ise çalının ortasından.
Hata çubukları, 0,05 anlamlılık düzeyindeki güven aralığını gösterir.
Tarlada, çalılığın alt ve orta yapraklarında oosporların oluşumu mikroiklimsel koşullarla da kolaylaştırılır: daha yüksek nem, azalan güneş ışığı ve günlük sıcaklık dalgalanmaları (Harrison, 1992). Yukarıdan püskürtme yapıldığında çalının alt ve orta kısımlarına daha az pestisit girer. Oospor oluşumunu azaltmak için fungisitlerin çalının alt ve orta kısımlarına başarılı bir şekilde iletilmesini sağlayan teknolojiler kullanılmalıdır. Çalılığın işlenmemiş kısımlarına yayılabilen türbülanslı hava akışına sahip püskürtücüler ve sistemik mantar öldürücüler kullanılarak iyi sonuçlar elde edilebilir.
Bu çalışma Rusya Bilim Vakfı (proje no. 14-50-00029) tarafından desteklenmiştir.
Makale "Patates Koruma" dergisinde yayınlandı (No. 2, 2015)